高效液相色谱法简介及其在药品检验中的应用
高效液相色谱法简介及其在药品检验中的应用
钟苑媚
广州白云山星群（药业）股份有限公司，广东省广州市，510288
【摘要】高效液相色谱法（HPLC），最早可追溯到上世纪70年代，HPLC检测方法和技术也一直在更新，随着科技发展近几年HPLC技术逐渐趋于完善，药品检验中也用到HPLC技术。该项技术以其灵敏度、特异度高的优点在药品检验行业很受欢迎，本文重点分析HPLC技术检验药品的价值，以期为临床药品检验工作提供更多参考。
【关键词】药品检验；高效液相色谱法；简介
目前临床上的检验技术多种多样，药物成分、癌症、动物实验等都会用到检验技术，其中高效液相色谱法（HPLC）在临床上应用较多，与传统色谱技术相比，HPLC更加精细化，具有阻抗小、固定相均匀、分离效率高等优点，大幅提升检验的灵敏度[1]。而且HPLC技术的使用有效避免检测不精准情况的出现，同时借助相关的自动化技术，HPLC检验药品成分技术也越来越成熟。为进一步分析HPLC技术在药品检验的应用价值，本文围绕HPLC技术展开详细阐述。
一、HPLC检测技术
（一）HPLC概念
HPLC也被称为高速液压色谱法，采用液体检测流动相的相关参数，为保证检测过程的流畅性，需不断输送液体检测剂，使用高压输液系统完成输送过程。通过系统输送液体使各类溶剂进入到流动相泵，将混合液混合均匀后置入固定相色谱柱中。色谱柱内完成分离后，分开检测各类物质。HPLC过程迅速且能够快速分离色谱柱中各项物质，检测灵敏度高，因此适合用于食品、药物及生物等检验过程。
（二）HPLC发展
经过五六十年的发展，现代化HPLC技术逐渐趋于完善，并广泛应用于各个行业，为人类的健康保驾护航。HPLC技术用于医疗研究中，主要包括药物检验、临床试验等，研究内容与人类健康关系密切，且随着现代科技水平的提升，HPLC技术也不断更新。相信在科技的推进下，HPLC技术会发展得更好。
（三）HPLC组成与特点
进样器－输液泵－色谱柱－贮存器等共同组成高效液相色谱检测仪器，输液泵、检测仪及色谱柱质量必须严格把关，才能有效控制检验质量。若能在HPLC系统中增加微机控制器，不仅能够快速自动化处理数据，还能提升检验准确性。系统中不同组成部件承担不同作用，输液泵负责维持液体的稳定输送，进样器负责导入需检验的样本，贮存器用于暂时存储待检样本，色谱柱用于分离样本，检验仪最终测定样本中的各成分信息[2]。
二、药品检验中HPLC的应用
（一）药物鉴别
药品定性研究中需要用到HPLC技术，检测中会对药物时间与组分结构进行保留，最终得到准确的定性参数。以头孢羟氨苄的定性参数检测为例，含量测定项下的色谱图中，对照品主峰、供试品主峰保留时间维持一致。为进一步提升HPLC检测的灵敏度及准确性，可以将其他技术与HLPC技术联合应用，进而完成药物定性参数的检验。例如在加压素的成分检验中运用HPLC技术，可通过比较对照品、供试品离子峰质荷比一致性，检验出加压素的定性参数。常用的联合检测方式有指纹图谱联合HPLC技术、高效液相色谱－质谱联用技术等，既能突出应用色谱技术的分离能力、又能完美应用质谱技术的解析能力。
（二）HPLC检验药品物质成分
药物中各成分的含量及比例直接决定药品质量，药品包括主要成分和次要成分，同时也有杂质存在，杂质越多药物质量也越差，因此做好药品含量测定对把控药物质量具有重要意义。《中国药典》近年来进行多次修正，物质成分检测数量增加，由142个成分测定标准，增加到707个成分测定标准。例如在乳糖酸红霉素的物质成分检测中，最早采用TLC法，经改良发现HPLC检测方法的精准性更高，能够检测出乳糖酸红霉素中更多的杂质半点，且能准确测定杂质、主要成分、次要成分的含量，并确定出相关组成物质。
（三）HPLC检验药品成分含量
定量测定药物成分含量，是HPLC检测技术的功能之一，近年来《中国药典》关于药物成分含量测定的规定逐渐完善，将HPLC检测标准从359个增加到694个，增加药物成分含量检测数据，不断提升检验的精准度。例如在诺氟沙星含量检测过程中，药典规定其中诺氟沙星含量合格需达到75%及以上，但据1995年药典中的记载，发现采用HPLC复检发现一批诺氟沙星胶囊中主要成分含量不足30%，调查后发现药物严重造假，因此利用HPLC技术能够有效规避药物造假行为，降低医药产业的违法犯罪率。
（四）HPLC检验手性药物
手性药物对映体有两种，一种有毒，一种无毒，常规HPLC技术难以分离这两种对映体。因此临床检验引入手性色谱法，这种方法又包括直接法和间接法，直接法可以直接进行手性流动相分离操作，但为使检验精准度更高，临床推荐应用间接手性色谱法，即将需要拆分的对映体、固定相、手性源组合成非对映异构分子络合物，进而完成药物成分的检测。目前HPLC间接法中固定相类型较多，包括Pirkle型固定相、蛋白质类手性固定相、多糖类手性固定相、冠醚类手性固定相等。手性源流动相则包括环糊精添加剂、配体交换型手性添加剂、手性离子对添加剂。固定相、流动相的选择，需根据所检测药物的特性及设施情况而定。
三、结束语
通过本文分析可知，HPLC检测法在药品检验中的应用非常广泛，这一技术的优势在于检测时间短、检测准确性高。目前我国药品检验工作中，基本都采用HPLC技术，这位人类生活带来很多便利，同时提高临床用药安全性。检验技术的进步，不断改变人类生活，在今后的药物检验工作中，我们仍需继续发挥HPLC技术的优势，尝试结合光谱、柱切换技术、红外线吸收光谱等技术，进而提升HPLC检验的质量。
参考文献：
[1]段雯利, 王新科. 高效液相色谱法在药品检验中的应用效果观察及有效性分析[J]. 中国医药工业杂志, 2021, 52(10):1408-1408.
[2]徐大玮, 毕玉琦, 王骏,等. 高效液相色谱法在动物源食品中药物残留检验中的应用[J]. 中国食品添加剂, 2021, 32(10):95-102.
[3]陈果. QuEChERS-高效液相色谱法检测油料作物中氟磺胺草醚残留量[J]. 食品安全质量检测学报, 2020, 11(8):2380-2384.
